%0 Journal Article
%A 梁洁
%A 刘志昕*
%A 王祥
%A 余乃通
%A 张秀春
%A 周朋
%T 香蕉束顶病毒<em>nsp</em>酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活验证
%D 2015
%R 10.7525/j.issn.1673-5102.2015.05.017
%J 植物研究
%P 741-745
%V 35
%N 5
%X 香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)DNA6编码的核穿梭蛋白(nuclear shuttle protein，NSP)在病毒的侵染、复制、运输中起重要作用。为了利用酵母双杂交系统研究BBTV DNA6与寄主香蕉蛋白的互作，本实验利用两对引物的PCR扩增得到BBTV -<em>nsp</em>片段，混合各自PCR产物进行熔化退火可得到1/4两端含有<em>Eco</em>RⅠ和<em>Bam</em>HⅠ的酶切位点序列的DNA产物，将目的片段连接到酵母双杂交系统的pGBKT7诱饵载体中，成功获得pGBKT7-<em>nsp</em>，并将重组质粒pGBKT7-<em>nsp</em>转化入Y2H Gold酵母菌株中进行毒性检测和自激活验证。结果表明，pGBKT7-<em>nsp</em>没有自激活活性，同时对酵母细胞也无毒性，符合酵母双杂交诱饵质粒的要求，可用于下一步的蛋白互作实验。
%U https://bbr.nefu.edu.cn/CN/10.7525/j.issn.1673-5102.2015.05.017