%0 Journal Article %A 2 %A 2 %A 2 %A 2 %A 2 %A 3 %A 3 %A 3 %A 3 %A 3 %A 崔国新1 %A 刘关君1 %A 刘通1 %A 马静1 %A 许志茹1 %T 芜菁类黄酮3′-羟化酶基因的功能鉴定及启动子初步分析 %D 2015 %R 10.7525/j.issn.1673-5102.2015.04.016 %J 植物研究 %P 572-582 %V 35 %N 4 %X 类黄酮3′-羟化酶（Flavonoid 3′-hydroxylase，F3′H）是细胞色素P450单加氧酶，在花青素合成途径中催化二氢山奈酚生成二氢槲皮素，进而形成矢车菊色素。利用津田芜菁BrF3′H1和赤丸芜菁BrF3′H2基因构建过量表达载体后遗传转化烟草，转基因植株的花色加深。通过染色体步移法克隆了BrF3′H1和BrF3′H2基因上游846和851 bp的启动子序列。生物信息学分析表明，BrF3′H1P和BrF3′H2P均包含TATA box、CAAT box、光调控元件、MRE、ABRE、ATGCAAAT-motif、ERE、O2-site、RY-element、LTR等多个顺式作用元件；二者的核苷酸序列在7个位点存在差异。利用BrF3′H1P和BrF3′H2P序列替换pCAMBIA1301植物表达载体的35S启动子后遗传转化烟草。GUS组织化学染色结果表明，BrF3′H1P和BrF3′H2P序列均能驱动GUS基因表达。通过PCR方法获得了BrF3′H1P和BrF3′H2P的一系列缺失片段，融合GUS基因后转化烟草。染色结果显示，BrF3′H1P和BrF3′H2P系列缺失片段均具有起始GUS基因表达的活性。BrF3′H1和BrF3′H2基因的功能鉴定及启动子的初步分析将为揭示津田芜菁和赤丸芜菁F3′H基因的光诱导表达调控机理奠定研究基础。 %U https://bbr.nefu.edu.cn/CN/10.7525/j.issn.1673-5102.2015.04.016