%0 Journal Article
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%A *
%A Keith E.Wosete
%A 程飞
%A 张硕新
%A 赵鹏
%T 美国黑核桃SSR反应体系优化
%D 2012
%R 10.7525/j.issn.1673-5102.2012.02.015
%J 植物研究
%P 213-221
%V 32
%N 2
%X 优化SSR-PCR反应体系是黑核桃（Juglans nigra L.）SSR基因鉴定和群体遗传等研究的基础。本研究通过对PCR反应中Mg2+浓度、牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin,BSA）浓度、Taq聚合酶用量、dNTPs浓度、引物浓度和模板DNA量的组合以及PCR程序组合试验,确定了黑核桃SSR的最佳反应体系，即在10 μL的PCR反应体系中,含10 ng模板DNA,0.1 mg·mL-1牛血清蛋白（BSA）,0.25 mmol·L-1 dNTPs,1.5 mmol·L-1 Mg2+ 1 μL 10X Taq DNA聚合酶反应缓冲液,0.5 U Taq聚合酶,1.0 mmol·L-1单对引物（0.5 mmol·L-13对引物）。SSR-PCR反应扩增程序为：94℃变性3 min；93℃变性15 s，50℃或者53.5℃退火1 min，72℃延伸30 s，32个循环；72℃后延伸10 min，置4℃保存。利用此反应体系对黑核桃进行PCR扩增并电泳检测，其结果清晰、稳定、可靠，适合进一步对黑核桃群体遗传、基因型鉴定和分子生态研究。
%U https://bbr.nefu.edu.cn/CN/10.7525/j.issn.1673-5102.2012.02.015