马蔺幼胚高效再生体系的建立

doi:10.7525/j.issn.1673-5102.2023.03.002

植物研究 ›› 2023, Vol. 43 ›› Issue (3): 333-339.doi: 10.7525/j.issn.1673-5102.2023.03.002

马蔺幼胚高效再生体系的建立

安文杰¹, 王银杰², 刘清泉², 杨永恒², 张婷², 范少茹², 张永侠²(), 原海燕²

^1.山西林业职业技术学院，太原 030009
^2.江苏省中国科学院植物研究所，南京 210014

收稿日期:2022-09-29 出版日期:2023-05-20 发布日期:2023-05-11
通讯作者: 张永侠 E-mail:zhangyongxia@163.com
作者简介:安文杰（1978—），女，讲师，主要从事植物应用研究。
基金资助:
中央财政项目（苏［2021］TG04）;省级种质资源库项目(2021-SJ-012);科研教研基金资助项目(20200201);国家自然科学基金项目(41907135);Foundation item： Central Government Financed Project（苏［2021］TG04）;Provincial Germplasm Resource Bank Project(2021-SJ-012);Projects Supported by Scientific Research,Teaching and Research Fund(20200201);Natural Science Foundation Project(41907135)

Establishment of an Efficient Regeneration System in Iris lacteal var. chinensis with Immature Embryo

Wenjie AN¹, Yinjie WANG², Qingquan LIU², Yongheng YANG², Ting ZHANG², Shaoru FAN², Yongxia ZHANG²(), Haiyan YUAN²

^1.Shanxi Forestry Vocational Technical College，Taiyuan 030009
^2.Institute of Botany，Jiangsu Province and Chinese Academy of Sciences，Nanjing 210014

Received:2022-09-29 Online:2023-05-20 Published:2023-05-11
Contact: Yongxia ZHANG E-mail:zhangyongxia@163.com
About author:AN Wenjie（1978—），female，lecturer，major in the plant application.
Supported by:
Central Government Financed Project(苏［2021］TG04);Provincial Germplasm Resource Bank Project(（2021-SJ-012));Projects Supported by Scientific Research，Teaching and Research Fund((20200201));Natural Science Foundation Project(（41907135));Sichuan Breeding Project(2021YFYZ0032)

摘要/Abstract

摘要：

以马蔺（Iris lacteal var. chinensis）幼胚为外植体，探究不同时期幼胚及不同植物生长调节剂对愈伤组织、体胚和不定芽诱导的影响。结果表明：在本试验条件下最佳取材时间为授粉后35~45 d，此时，幼胚发育完全但胚乳尚未完全硬化，幼胚剥取容易；愈伤组织最适诱导培养基为MS+1.0 mg·L^-1 2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）+ 0.2 mg·L^-1 6-苄氨基嘌呤（6-BA），诱导率为83.33%；最适体胚诱导培养基为MS+0.25 mg·L^-1 2，4-D+0.05 mg·L^-1 6-BA，诱导率71.67%；最佳不定芽诱导和增殖培养基为MS+1.0 mg·L^-1噻苯隆（TDZ）+0.2 mg·L^-1萘乙酸（NAA），诱导率为78.33%，增殖系数为3.65；在添加0.1 mg·L^-1 NAA的MS培养基上诱导生根，4周后的生根率达95%以上；生根培养4周的植株清洗掉根部培养基后，移栽至经高温消毒的蛭石中培养，成活率达95% 以上。该研究建立了高效的马蔺再生体系，可为马蔺的遗传改良和基因功能研究奠定基础。

关键词: 马蔺, 幼胚, 离体培养, 愈伤诱导, 高效再生

Abstract:

The effect of sampling time and plant growth regulators on the induction of callus， somatic embryo and adventitious bud were investigated with immature embryos of Iris lacteal var. chinensis as explants. The results showed that the most feasible sampling time for immature embryos was 35-45 d after pollination， the young embryos were fully developed， but the endosperm was not completely hardened， and the young embryo was easy to dissect. The optimum medium for callus induction was MS+1.0 mg·L^-1 2，4-D+0.2 mg·L^-1 6-BA with the induction rate of 83.33%. The appropriate medium for somatic cell induction was MS+0.25 mg·L^-1 2，4-D+0.05 mg·L^-1 6-BA with the induction rate of 71.67%. The most suitable medium for adventitious bud induction and proliferation was MS+0.2 mg·L^-1 TDZ+0.05 mg·L^-1 NAA with the induction rate of 78.33% and proliferation coefficient 3.65 in this experiment. The rooting rate was more than 95% after four weeks cultivation on MS medium supplemented with 0.1 mg·L^-1 NAA. Then， the medium was washed off and explants were transplanted to sterilized vermiculite， and the survival rate was more than 95%. This study has established an efficient regeneration system of I. lacteal var. chinensis embryos， which can lay a foundation for genetic transformation and gene function analysis of I. lacteal var. chinensis.

Key words: Iris lacteal var. chinensis, immature embryo, callus induction, in vitro, regeneration

中图分类号:

S682.1+9

安文杰, 王银杰, 刘清泉, 杨永恒, 张婷, 范少茹, 张永侠, 原海燕. 马蔺幼胚高效再生体系的建立[J]. 植物研究, 2023, 43(3): 333-339.

Wenjie AN, Yinjie WANG, Qingquan LIU, Yongheng YANG, Ting ZHANG, Shaoru FAN, Yongxia ZHANG, Haiyan YUAN. Establishment of an Efficient Regeneration System in Iris lacteal var. chinensis with Immature Embryo[J]. Bulletin of Botanical Research, 2023, 43(3): 333-339.

图/表 5

图1

表1

表2

表3

表4

参考文献 31

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处理 Treatment	2，4-D /（mg·L^-1）	6-BA /（mg·L^-1）	愈伤组织出现时间 Time of callus formation /d	愈伤组织诱导率 Callus induction rate /%	愈伤组织状态 Callus status
C1	0.5	0.1	20	53.33±8.82c	浅黄色，结构紧密，颗粒状 Light yellow，compact strcture， granular
C2	1.0	0.2	12	83.33±3.34ab	浅黄色，结构紧密，颗粒状 Light yellow，compact strcture， granular
C3	1.0	0.5	12	76.67±3.34b	黄色，大颗粒 Yellow， big granular
C4	1.5	0.2	10	81.11±8.39ab	淡黄色和透明白色，致密颗粒和松软组织 Light yellow and white，compact and soft strcture
C5	1.5	0.5	11	77.78±3.85ab	黄色和白色，大颗粒和松软组织 Yellow and white，big granular and soft strcture
C6	2.0	0.2	10	87.78±5.09a	淡黄色和透明白色，致密颗粒和松软组织 Light yellow and white，compact and soft strcture
C7	2.0	0.5	10	83.33±3.34ab	黄色和白色，大颗粒和松软组织 Yellow and white， big granular and soft strcture

处理 Treatment	TDZ /（mg·L^-1）	6-BA /（mg·L^-1）	NAA /（mg·L^-1）	不定芽诱导率 Induction rate /%	增殖系数 Proliferation coefficient
S1	0.5	0	0.1	55.00±5.00b	1.80±0.25c
S2	1.0	0	0.2	78.33±5.77a	3.65±0.26a
S3	1.5	0	0.2	68.33±2.89a	3.45±0.40ab
S4	0	0.5	0.1	33.33±7.64c	1.30±0.23d
S5	0	1.0	0.2	51.67±2.89b	2.23±0.10c
S6	0	1.5	0.2	45.00±8.66b	3.07±0.25b

处理 Treatment	NAA /（mg·L^-1）	生根率 Induction rate /%	根的状态 Roots status
R1	0	100	细弱，数量少 Weak，small quantity
R2	0.1	100	柔软、健壮，数量多 Soft and strong，large quantity
R3	0.2	100	柔软、健壮，数量多 Soft and strong，large quantity
R4	0.5	100	粗短、质硬、易断，数量多 Short，hard，easy to break，large quantity

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Establishment of an Efficient Regeneration System in Iris lacteal var. chinensis with Immature Embryo

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